1. 成果介绍
本团队在常规毕赤酵母表达系统的基础上,通过底盘细胞改造,表达原件优化,辅因子引入,高通量筛选技术和发酵工艺优化等多种技术手段,进一步提升了其该系统的表达效率。其中重组乳糖酶和葡萄糖氧化酶的表达量达到10 g/L以上,并转让合作企业进行大规模生产和销售。另有多种蛋白也达到了1 g/L以上的表达量。而且本团队建立完善了包括毕赤酵母表达系统涉及的基因克隆、转化、高通量筛选、高密度发酵、蛋白纯化、性质分析等研发全链条。
2. 研发背景及市场应用前景
巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)是一个生产外源蛋白的优秀宿主。该表达系统具有调控严格、可进行糖基化等翻译后修饰,表达量高,表达产物可分泌至胞外,遗传稳定,培养廉价,高密度发酵等突出优点,其在医药、食品等多个行业得到广泛应用。迄今为止,国内外已有上千种异源蛋白在该表达系统中获得了高效表达。
本团队优化完善的毕赤酵母表达系统,可以为科研单位和企业提供全链条的重组蛋白表达技术服务,如植物基因功能验证、重组表达蛋白以用于生产抗体、各种重组蛋白的规模化生产。
3. 成熟度:可直接应用
4. 技术水平:国内先进
5.应用情况
毕赤酵母生产重组乳糖酶和葡萄糖氧化酶通过技术转让的形式实现了转化。